Таблица 1. Методы определения аффинности антител

Методы	Используемые антигены
Равновесный диализ Осаждение глобулиновой фракции сульфатом аммония Осаждение углем, модифицированным декстраном Осаждение антиглобулинами Гельфильтрация, разделение по молекулярной массе Тушение флуоресценции Усиление флуоресценции Поляризация флуоресценции Спектральные методы Тушение биолюминесценции	Гаптены, диализуемые антигены Гаптены, антигены, растворимые при 50%-ном насыщении сульфатом аммония Гаптены Гаптеиы, белки, полисахариды Гаптены, белковые полисахариды Гаптены и антигены со специфическими флуоресцентными свойствами Гаптеиы, белки Гаптены, белки Гаптены, связанные с красителем Гаптены, белки

Метод деполяризации флуоресценции основан на измерении поляризации флуоресценции антигена, меченного красителем, до взаимодействия с антителами и после комплексообразования. Поляризация флуоресценции определяется молекулярным объемом частицы и степенью ее асимметрии. Комплексообразование антигена с антителом сопровождается резким изменением поляризации флуоресценции красителя, который играт роль метки антигена или антитела. Предел обнаружения антигена этими методами достаточно мал. Недостатками методов, основанных на измерении флуоресценции, являются необходимость работы с препаратами очищенных антител и строгие требования к структуре изучаемых антигенов. Вследствие этого флуоресцентные методы не являются универсальными и могут быть применены для ограниченной группы антигенов.

Методы тушения биолюминесценции основаны на использовании в качестве маркера АТР, пришитой к' молекуле антигена. В составе такого комплекса молекула АТР сохраняет активность в реакции биолюминесценции, катализируемой светлячковой люциферазой. При добавлении антител образуется комплекс с антигеном, в котором молекула АТР становится недоступной ферменту, в результате чего ингибируется реакция биолюминесценции. Указанный метод обладает высокой чувствительностью, что позволяет измерять константы ассоциации до 10-12 М.

Перечень экспериментальных методов определения аффинности взаимодействия антиген — антитело приведен в табл. 1.

Прочие статьи:

Биология XX в.: познание молекулярного уровня жизни. Предпосылки развития современной биологии
Современная биология основывается на тех достижениях, которые были сделаны в этой науке во второй половине XIX в.: создание Ч. Дарвином эволюционного учения, основополагающие работы К. Бернара в области физиологии, важнейшие исследования ...

Неантроп
Время появления человека современного вида приходится на начало позднего палеолита (70-35 тыс. лет назад). Оно связано с мощным скачком в развитии производительных сил, становлением родового общества и следствием процесса завершения биоло ...

Популяционные данные.
17. 05. 07. Закладка транссект. Цель: определить состояние популяции Ириса Низкого Методом закладки транссект для регионального кадастра редких видов растений. Лимитирующий фактор: опушка леса, грунтовая дорога, пахота. Координата: ...