Для приготовления гомогената использовали буфер 0,025 М трис HCl (pH 7,4), содержащий 0,175 М хлорида калия. Гомогенат (25%) по 2 мл помещают в центрифужные пробирки и осаждают белок добавлением 0,2 мл 50%-ного раствора ТХУ.
Образующийся осадок отделяют центрифугированием в течение 10 мин. при 4000g. 2 лм надосадочной жидкости доводят 96% этанолом до 27 мл. К равным объемам до 27 мл добавляют 0,2 мл концентрированной соляной кислоты и 0,025 мл 5%-ного раствора соли Мора в 3%-ной соляной кислоте, пробы интенсивно встряхивают. Точно через 30с приливают 1мл 20%-ного раствора роданистого калия, после чего развивается малиновая окраска. В качестве контроля используют пробы, содержащие 96%-ный этанол вместо НЖ. Изменение оптической плотности проводят в течение 10 мин. после добавления роданистого калия при 480 нм.
Прочие статьи:
Дайте понятие внутренней энергии. Какие виды
внутренней энергии вы знаете? Как изменяется внутренняя энергия? В чем сущность
первого начала термодинамики?
Внутренняя энергия - это энергия движения и взаимодействия частиц, из которых состоит вещество.
Внутренняя энергия любой системы складывается из энергий, входящих в нее атомов и молекул. Она представляет собой сумму кинетической ...
Здоровье человека. Демографические проблемы
Проблема сохранения здоровья населения особенно актуальна в современном обществе, отличающемся негативной характеристикой основных демографических показателей наряду с прогрессирующим распространением алкоголизма, наркотоксикомании и забо ...
Дайте классификацию вещества биосферы на основе учения Вернадского о
биосфере.
Биосфера — совокупность частей земной оболочки (лито-, гидро- и атмосфера), которая заселена живыми организмами, находится под их воздействием и занята продуктами их жизнедеятельности. Термин «биосфера» был предложен австрийским геологом ...

